제1장 단백질의 분리동정에서 기능해석까지 岡田雅人 12
1-1 단백질 분리동정의 진행방법 12
1-2 단백질 기능해석을 향해서 15
1 항체를 이용한 단백질의 분리와 검출
2 단백질의 번역 후 수절의 해석
3 단백질 상호작용의 해석
1-3 끝으로 16

제2장 전기 영동법에 의한 단백질의 분리

1. Polyacrylamide gel 전기영동 17
1-1 SDS-polyacrylamide gel 전기영동(SDS-PAGE) 奧村宣明 17
1-2 단백질의 염색 奧村宣明 24
1 CBB 염색 2 은염색 3 SYPRO Ruby 염색
4 SDS-PAGE로부터 단백질 회수
1-3 기타 전기 영동법 奧村宣明 30
1-4 SDS-PAGE에 의한 단백질의 정제법 赤莢辛太郞, 官崎 香 32
1 확산법에 의한 추출법 2 전기영동 용출법
3 조제용 전기 영동 장치

2. Western Blotting 奧村宣明 40
2-1 단백질의 membrane에로의 전사와 Ponceau S 염색 41
2-2 항체와의 반응과 항원의 검출 44
1 Bloking과 항체와의 반응 2 HRP반응에 의한 항원의 검출-DAB법
3 HRP반응에 의한 항원의 검출-화학발광법
4 Alkaline phosphotate 반응에 의한 항원의 검출
2-3 Band의 정량 49
1 Scanner 또는 CCD 카메라를 이용한 방법
2 화학발광검출용의 고감도 CCD 카메라를 이용한 방법
3 125I를 이용한 방법 4 Radioimmunoassay
3. Peptide Mapping 52
3-1 SDS-PAGE상에서의 일차원 mapping 佐英德 52
1 Protease(cleveland mapping)
2 CNBr 분해
3-2 TLC상에서의 2차원 Mapping 柳 茂 58
1 세포의 표식 2 면역침강·전기영동·막에의 전사
3 Trypsine digest에 의한 인산화 peptide map

제3장 단백질의 동정법

1. Proteome 해석 68
1-1 서론 岩松明彦 68
1-2 해석의 진행방법 岩松明彦 68
1-3 Immobiline을 이용한 2차원 전기 영동법(1차원째 조작방법을 중심으로) 谷 誠 71
1 1차원째 : 등전점 전기영동 2 2차원째 : SDS-PAGE
3 단백질의 염색법, 해석법
1-4 일차 구조해석을 위한 blotting법 岩松明彦 81
1-5 PMF 해석실행에 맞는 선택 岩松明 84
1-6 PVDF막위의 단백질의 환원 S-alkyl화와 protease의 digestion 岩松明彦 85
1-7 질량분석과 Peptide mass fingerprinting (PMF)법에 의한 단백질 동정 岩松明彦 89
2. 아미노산 배열결정법
2-1 분석을 위한 시료의 조제 98
1 SDS-PAGE의 band 혹은 이차원 전기영동 겔의 Spot의 N 말단 분석법
2 SDS-PAGE 혹은 이차원 전기영동법으로 분리한 단백질 Spot의 내부 배열분석
3 SDS-PAGE 혹은 이차원 전기영동법으로 분리한 단백질 Spot의 고감도clevedland법에 대하여
2-2 시료의 탈염, 농축법 105
1 단백질 혼합물의 농축법
2-3 Protein Sequencer에 의한 아미노산 배열분석 108
2-4 아미노산에 따른 분석상의 문제점 109

제4장 항체를 이용한 단백질의 분리와 검출

1. 항체 column에 의한 단백질의 정제 宮崎 香 廣智巳
1-1 실험조작의 개략 113
1 항체 2 항체 column 3 항원 단백질의 정제
1-2 항체 column의 제작 114
1-3 항체 affinity chromatography의 조작법
-항 laminin α3 monoclonal 항체 column을 이용한 laminin
5(ladosine)laminin 5(ladosine)의 정제 117
2. 면역침강법 小阪智博 東 昌市
2-1 일반적 방법과 원리 120
1 Monoclonal 항체를 이용할 경우 2 Polyclonal 항체를 이용할 경우
3 항원-항체반응의 조건 4 용출조건
2-2 면역 침강법을 이용한 세포막 표층 단백질의 검출
-대장암 세포에 있어서 세포표층의 E-cadherin의 검출 122
3. 면역 염색법 森山佳谷乃
3-1 주요한 실험조건 127
1 검출법의 선택 2 항체의 선택 3 표본의 제작 4 기타
3-2 Formalin고정·Paraffin 절편의 염색 130
3-3 배양세포를 이용한 염색 135
1 접착배양세포의 형광 염색 2 부유 세포의 경우

제5장 수절단백질의 해석

1. 인산화 단백질 岡田雅人
1-1 인산화 단백질의 검출 142
1 항체를 이용한 인산화 검출법
2 항 인산화 Tyrosine 항체를 이용한 western blotting
3 간접적인 인산화 검출법
4 Radioisotope(R)를 이용한 인산화 검출법
1-2 인산화 아미노산의 분석 152
1-3 인산화 부위의 동정법 156
1 부위특이적 변이체를 이용한 해석 2 Peptide mapping법
3 질량분석에 의한 해석 4 아미노산 Sequencer를 이용한 방법
2. 당쇄 米田敦子 松本勳武
2-1 렉틴을 이용한 해석 159
2-2 당쇄의 절단 161
2-3 당쇄의 구조해석 162
1 단당조성 분석 2 Pyridylamino화 3 HPLC 분석
4 당쇄구조 해석

부 록
1. 유용한 internet site의 소개 168
2. 주요한 시약의 분자량 171
3. 단백질 분자량 조견표 171

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